利用无参考基因组SSR开发方法筛选微卫星序列并结合测序分型方法对分离的微卫星序列进行基因分型。利用两个样本的全基因组测序数据,通过ebwt2InDel软件从这两个样本的测序数据中寻找包含InDel标记的序列。基于包含InDel标记的序列,利用MISA软件搜索包含SSR的序列并删除非SSR型InDel标记的序列,最终得到包含完美型SSR的序列111条。利用测序分型软件SSRgenotyper对30尾日本沼虾(Macrobrachium nipponense)测序样本进行多态性分析,111条含SSR的序列中,共有19个SSR可以成功分型,分型成功率为17.12%。分型成功的19个SSR 位点均为3碱基重复4~6次,其中以ATC/ATG为单位的重复序列占比最多,为6个( 31.58%)。19个SSR中,低度信息含量的标记2个,中度信息含量的标记17个。本研究制备的19个微卫星标记可用于评估日本沼虾种群的遗传参数,为日本沼虾种质资源的开发提供有用的遗传标记。

为解析三角鲂(Megalobrama terminalis)和团头鲂(M.amblycephala)抗嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染的差异,通过Illumina HiSeq测序平台对感染后三角鲂和团头鲂开展了转录组测序。结果表明,三角鲂和团头鲂样本经测序、过滤后共获得62 780个Unigenes,平均长度达到531.883 bp,Unigenes的N50为652 bp。比对数据库后,62 780个Unigenes中有35 443个可注释到NR数据库,比例最高,为56.46%;仅有8 632个Unigenes可注释到COG数据库,比例最低,为13.75%。62 780个Unigenes中,有33 693个Unigenes在三角鲂中表达,有32 936个Unigenes在团头鲂中表达,其中有24 834个Unigenes在三角鲂和团头鲂中共表达。差异基因表达趋势聚类分析表明,三角鲂、团头鲂在3 h和24 h时间点上基因表达趋势可划分为6类,其中聚类模式4所包含的差异表达基因最多,为16个;聚类模式1所包含的差异表达基因数量为15个;聚类模式5包含基因最少,为4个。GO富集分析表明,三角鲂和团头鲂感染后表达差异基因多集中在免疫反应(GO: 0006955)、抗原递呈(GO:0019882)和细胞膜(GO:0016020)等GO条目上。KEGG通路富集分析表明,自身免疫性甲状腺疾病(ko05320)、Ⅰ型糖尿病(ko04940)、病毒性心肌炎(ko05416)、细胞黏附分子(ko04514)和抗原递呈(ko04612)5个KEGG通路是富集程度最高的。以上GO和KEGG富集分析表明,三角鲂和团头鲂感染后基因表达差异与抗原递呈相关基因密切相关。本研究结果为解析三角鲂和团头鲂在嗜水气单胞菌感染上的差异性提供了研究基础。